Что представляет собой метод ИКСИ (ICSI)– остро интересует женщин, готовящихся к ЭКО с применением этой методики.
Наука шагнула вперед. И теперь диагноз “бесплодие” – уже не одно и то же что бездетность. Великое открытие и труд эмбриологов, репродуктологов позволяют обходить много препятствий на пути к материнству.
Показания к оплодотворению методом ИКСИ
К проведению оплодотворения методом ИКСИ обращаются в следующих случаях:
- Нерезультативные попытки ЭКО в анамнезе: неудовлетворительный показатель оплодотворения в предыдущих протоколах (менее 50%).
- Различные варианты нарушений в строении и подвижности сперматозоидов (мужской фактор).
- Недостаточное количество сперматозоидов в эякуляте или их отсутствие.
- Использование размороженной спермы со снижением показателей качества и количества.
- Женщина старше 39 лет.
- Необходимость проведения предимплантационной диагностики – при повышенном риске развития генетических мутаций.
- Значительное количество в эякуляте (по результатам MAR-теста) антиспермальных антител (более 50%) – так называемое иммунологическое бесплодие.
- Сочетанные нарушения спермы.
- В результате стимуляции получено мало ооцитов (женских половых клеток).
- Использование в программе донорской криоконсервированной яйцеклетки.
Как видно из перечня, в основном ИКСИ делают в случаях нарушения сперматогенеза и применения криоконсервации. В случаях, когда нужно провести анализ ПГД методом CGH обязательно прибегают к этой технике.
Эффективность метода ИКСИ
Вероятность оплодотворения варьирует от 60 до 100% случаев. Из которых в 90–95% развиваются полноценные и здоровые эмбрионы. Такие показатели эффективности ИКСИ связаны в первую очередь с тем, что в программе выбираются сперматозоиды с самыми лучшими морфологическими характеристиками. На сегодняшний день есть еще две методики, усовершенствующие отбор сперматозоидов – ПИКСИ и ИМСИ.
Как происходит ИКСИ и в чем отличие от ЭКО?
Все этапы до момента оплодотворения идентичны ЭКО. Отличие в том, что оплодотворение происходит не самостоятельно, а при помощи микроманипуляции под микроскопом многократного увеличения. Отобранный сперматозоид вводят в яйцеклетку, предварительно сделав прокол специальным инструментом – капилляром. Принципиальное отличие ИКСИ от ЭКО – эмбриолог не дает шанс природе выбрать лучший сперматозоид, а делает это за нее.
ИКСИ происходит в четыре этапа:
- Оценка качественных характеристик полученных яйцеклеток (после пункции). Эмбриолог, изучая ооцит, не может заглянуть внутрь клетки, но по качественным признакам – по внешнему виду и форме мембраны, наличию/отсутствию включений, вакуолей ориентируется, стоит ли брать такую клетку в работу.
- Помещение чашек Петри с яйцеклетками в специальный CO² инкубатор. Это термошкаф с температурой 37° C и концентрацией углекислого газа – 5%. Такие условия имитируют внутреннюю среду женского организма. Клетки «отдыхают» в течение нескольких часов.
- Подготовка сперматозоидов. Выбирают лучший и самый качественный по морфологическим признакам.
Сперматозоиды занимают лишь 3% от эякулята, потому необходимо тщательно очистить пробу спермы от семенной жидкости, включений и отобрать самые перспективные, сильные, подвижные сперматозоиды. С этой целью используют жидкие фильтры (водный раствор поливинил пиралидоновых гранул разной плотности) и центрифугирование.
На дно пробирки наслаивают сначала раствор более плотных гранул, затем сверху на него – менее плотный слой. Поверх слоев жидких фильтров помещают сперму и центрифугируют. Что позволяет получить фракции семенной плазмы и криоконсервантов (при криоконсервации спермы) в верхнем слое, а сперматозоиды опустятся вниз. Причем оба слоя способны пройти только подвижные клетки, которые и будут использоваться для оплодотворения.
Для эффективного выполнения ИКСИ эмбриолог должен обладать глубоким опытом. Среди большого количества клеток доктор должен найти сперматозоид с правильной формой головки, хвоста и прямолинейным движением (со скоростью равной или больше 25 микрон в секунду).
Непропорционально большая головка говорит о том, что есть хромосомные нарушения, ведь весь генетический материал находится именно в ней. Такой сперматозоид не подходит для оплодотворения.
Лечение азооспермии
Подбор сперматозоида для оплодотворения – очень ответственный этап. Опытный эмбриолог зачастую словами не сможет объяснить, почему определенный сперматозоид ему не нравится. Но опыт подсказывает, что этот сперматозоид – даст хороший эмбрион, а этот – плохой.
Работа проводится при помощи специальных приборов – микроманипуляторов. Такое оборудование позволяет делать очень точные движения (в сотые доли микрон). Крупные движения рук переводятся в тонкие движения манипуляторов. Все манипуляции проводятся на антивибрационном столе. Если бы ИКСИ проводилось на обычном столе, то даже шаги в соседнем кабинете могли бы повредить клетки и микроинструменты.
- Оплодотворение яйцеклетки. На предметный столик помещают чашку с яйцеклеткой и сперматозоидами, которые находятся в разных каплях раствора. Руками эмбриолога становятся инструменты – микропипетка и капилляр – трубочка из стекла, сходящаяся на конце в невидимую нить и заточенная специальным образом.
Капилляром ловят сперматозоид, предварительно отсекая ему хвост, и вводят под оболочку яйцеклетки. Отсечение хвоста приводит к увеличению шансов на успешное оплодотворение. В естественных условиях при зачатии ребенка хвост не попадает под оболочку яйцеклетки. Во время проведения ИКСИ моделируются условия естественного зачатия. Присутствие хвоста может приводить к образованию нежелательных включений и комплексов у эмбриона.
Яйцеклетку фиксируют микропипеткой, создав в ней отрицательное давление, прокалывают и вводят сперматозоид. На этом этапе оплодотворение завершено.
Оплодотворенную яйцеклетку возвращают в инкубатор и наблюдают за культивацией в течение 3–5 дней.
Несмотря на то, что оплодотворение методом ИКСИ – дорогостоящая процедура, она широко применяется в репродуктивных клиниках Украины, России и по всему миру. Метод перспективный, надежный и эффективный.